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移液槍如何實現滅菌操作?
[2020/7/9]
疑惑:
實驗中,需要用移液槍來移液,槍頭滅菌了但槍不能滅菌,怎麽(me) 實現無菌操作?要移的液體(ti) 量隻有幾十微升用移液管不好實現,主要是擔心槍裏麵的無菌情況,在吸打時那些空氣是直接接觸液體(ti) 的呀。
支招:
1.有可以滅菌的移液槍,如果沒有 還是用吸管好 別圖省事~或者可以用紫外線進行照射,表麵滅菌還可以。
2.槍頭滅菌,移液槍70%酒精擦拭。移液時注意慢吸快打,移液量不超過槍頭2/3即可。
3.你可以在槍頭上部塞上脫脂棉再去滅菌,然後再使用。
4.我看用移液槍的問題關(guan) 鍵在於(yu) 你要求的無菌級別高低以及操作的規範和熟練程度。我現在做活菌計數就用移液槍做梯度稀釋,沒有問題,很少有雜菌汙染。
體(ti) 會(hui) :
1.移液槍可以浸泡在75%酒精中過夜,甚至更長時間;
2.移液時槍盡量不要碰到器皿壁;
3.最好在超淨工作台上操作,超淨工作台內(nei) 的空氣可以認為(wei) 是無菌的,這樣吸進槍管中的空氣很少,可以認為(wei) 樣品不會(hui) 被汙染;
4.操作熟練程度關(guan) 係實驗成敗,建議你先用普通肉湯培養(yang) 基,和其他非實驗菌進行操作練習(xi) ,熟練後再進行你的正式試驗。
5.關(guan) 鍵是滅菌的tip頭是要有脫脂棉的tip頭,然後對移液槍進行表麵消毒就行了。
6.其實不用那麽(me) 麻煩,你可以將一般的移液槍放在超淨台中,打開紫外燈滅菌半小時,使用時先將移液槍用(70%-75%)酒精棉擦拭表麵,然後在酒精燈火焰上2cm左右處將移液槍反複吹打幾次即可。有網友是這麽(me) 操作的,也沒有出現染菌的問題!
7.移液槍放置在超淨台中和台子一起紫外滅菌半小時;槍身用75%酒精擦拭;槍頭塞入脫脂棉一起滅菌;這樣使用應該沒問題,以網友實踐經驗來說。
8.槍頭是經過高壓消毒的,直接接觸液體(ti) 的是槍頭又不是別的,網友覺得剩下的無非就是無菌操作的問題了,紫外線消毒移液槍就足夠了,還泡啥泡,多餘(yu) .
小結
關(guan) 於(yu) 如何保證移液器的無菌使用,不少朋友提出用紫外線照射,實際上並不恰當。
首先,移液器的杆柄(通常為(wei) 白色部分)是有機高分子化合物,說白了就是類似塑料的東(dong) 西。日常生活中大家知道,露天暴曬的塑料容易變脆。經常用大劑量、長時間的紫外線照射移液器同樣會(hui) 極度加速其老化。我們(men) 實驗室曾經有一把槍從(cong) 前麵的金屬圈處(圖中a處)斷掉,維修人員給出的解釋之一就是經常照射使其脆性增加。
其次,將移液器放在超淨台中照射時,其靠近台麵的一側(ce) 以及被金屬架遮蓋的部分並不能被照到,所以消毒是不徹底的。
有朋友提出將移液器在酒精燈2cm處反複吸吹幾次以消毒內(nei) 部空氣的方法。這樣操作時移液器的的末端同樣可能因溫度高而加速老化,天長日久甚至可能導致局部變形,而一旦末端不是絕對的圓潤,且老化後喪(sang) 失應有的彈性,其與(yu) 槍頭之間的密封性將不能得到保證。
另外對於(yu) 實驗室多人公用的移液器,有時會(hui) 有人不注意就將培養(yang) 液等吸入移液器杆柄而又未能及時清理,最後會(hui) 在杆柄內(nei) 部形成衛生死角,甚至成為(wei) 汙染源。
根據經驗,針對移液器(或類似結構者)推薦下列使用保養(yang) 方法:
1.日常消毒,用70%酒精棉球擦拭移液器杆柄表麵。使移液器末端(a端)稍低於(yu) 手持端(c端)並使金屬推杆在下方(如圖),使用吸滿酒精的棉球,還能夠保證移液器的金屬退杆內(nei) 麵被酒精覆蓋、消毒。按動金屬退杆同時擦拭被退杆末端(a處)環柄包住的部分。對重要實驗若需更加仔細消毒,可將金屬退杆拔下,徹底擦拭消毒。
2.不定期將金屬退杆拔下,將白色塑料杆柄從(cong) b處擰下,用酒精棉球清理杆柄內(nei) 部。此時可能需要使用鈍頭鐵絲(si) 等挾持小棉球以便夠著末端較細的部位。