該如何正確選擇二氧化碳培養箱
[2019/10/22]
二氧化碳培養(yang) 箱原理是其通過在培養(yang) 箱箱體(ti) 內(nei) 模擬形成一個(ge) 類似細胞/組織在生物體(ti) 內(nei) 的生長環境如恒定的酸堿度(pH值:7.2~7.4)、穩定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩定的CO2水平(5%),來對細胞/組織進行體(ti) 外培養(yang) 的一種裝置。二氧化碳培養(yang) 箱廣泛應用於(yu) 醫學、免疫學、遺傳(chuan) 學、微生物、農(nong) 業(ye) 科學、藥物學的研究和生產(chan) ,已經成為(wei) 上述領域實驗室最普遍使用的常規儀(yi) 器之一
全世界的用戶對二氧化碳培養(yang) 箱都有兩(liang) 條最基本的要求,一是要求二氧化碳培養(yang) 箱能夠對溫度、二氧化碳濃度和濕度提供最精確穩定的控製,以便於(yu) 其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yang) 箱能夠對培養(yang) 箱內(nei) 的微生物汙染進行有效的防範,並且能夠定期消除汙染,以保護研究成果,防止樣品損失。所以,選購二氧化碳培養(yang) 箱的老師最關(guan) 心的當然就是其高可靠性、對汙染的防範和控製及使用方便。
一、溫度控製
1. 加熱方式:
氣套式加熱和水套式加熱,兩(liang) 種加熱係統都是精確和可靠的,同時它們(men) 都有著各自的優(you) 點和缺點。
水套式加熱是通過一個(ge) 獨立的水套層包圍內(nei) 部的箱體(ti) 來維持溫度恒定的,其優(you) 點:水是一種很好的絕熱物質,當遇到斷電的時候,水套式係統就可以比較長時間的保持培養(yang) 箱內(nei) 的溫度準確性和穩定性(維持溫度恒定的時間是氣套式係統的3~4倍),有利於(yu) 實驗環境不太穩定(如有用電限製,或者經常停電)並需要保持長時間穩定的培養(yang) 條件的用戶選用。
氣套式加熱是通過遍布箱體(ti) 氣套層內(nei) 的加熱器直接對內(nei) 箱體(ti) 進行加熱的,又叫六麵直接加熱。氣套式與(yu) 水套式相比,具有加熱快,溫度的恢複比水套式培養(yang) 箱迅速的特點,特別有利於(yu) 短期培養(yang) 以及需要箱門頻繁開關(guan) 的培養(yang) 。此外,對於(yu) 使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,並要經常監控水箱運作的情況)。
2. 溫控係統:
保持培養(yang) 箱內(nei) 恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素,因此精確可靠的溫控係統是培養(yang) 箱不可或缺的重要部分。為(wei) 了使培養(yang) 箱更加穩定的工作,我們(men) 推薦用戶選用具備相互獨立三重溫度控製功能的二氧化碳培養(yang) 箱,即箱內(nei) 溫度控製、超溫報警控製和環境溫度監控。
我們(men) 知道培養(yang) 箱的最低工作溫度一般是高於(yu) 室溫5℃,如果沒有緩慢加熱模式就非常容易在夏天高溫天氣(如室溫30℃左右時)產(chan) 生箱內(nei) 溫度過高;HF90的獨立超溫報警功能能夠快速準確的在培養(yang) 箱內(nei) 溫度高於(yu) 培養(yang) 溫度1℃時,切斷培養(yang) 箱的主加熱係統,同時聲光報警;HF90的環境溫度監控可以根據環境溫度的變化自 動調節培養(yang) 箱外門輔助加熱係統的功率,達到精確控製箱體(ti) 內(nei) 溫度的目的。
3. 溫度均一性:
二氧化碳培養(yang) 箱箱體(ti) 內(nei) 的溫度均一性也是用戶需要考慮的主要因素,一般在箱體(ti) 內(nei) 配備了風扇以及風道的培養(yang) 箱的均一度要好很多,同時此裝置還有助於(yu) 箱內(nei) 溫度、CO2濃度和相對濕度的迅速恢複。
當然,風扇/風道的優(you) 化也是同等重要的,HF90二氧化碳培養(yang) 箱獨特設計的大直徑風扇和循環風道能夠保證箱體(ti) 內(nei) 溫度和二氧化碳濃度的均一性。大直徑風扇相比其他品牌培養(yang) 箱的風扇,能夠在低轉速(低風速)時產(chan) 生大的空氣循環流量,在達到均一性目的的同時,降低風速、減少箱內(nei) 震動。降低風速、減少震動同時也就大大提高了箱內(nei) 細胞培養(yang) 的成功率。
二、二氧化碳濃度控製
1. 兩(liang) 種控製係統:
紅外傳(chuan) 感器(IR)或熱導傳(chuan) 感器(TCD)進行測量。兩(liang) 種傳(chuan) 感器都是準確的,但都各有優(you) 缺點。熱導傳(chuan) 感器監控CO2濃度的工作原理是基於(yu) 對內(nei) 腔空氣熱導率的連續測量,輸入CO2氣體(ti) 的低熱導率會(hui) 使腔內(nei) 空氣的熱導率發生變化,這樣就會(hui) 產(chan) 生一個(ge) 與(yu) CO2濃度直接成正比的電信號。紅外傳(chuan) 感器(IR)它是通過一個(ge) 光學傳(chuan) 感器來檢測CO2水平的。IR係統包括一個(ge) 紅外發射器和一個(ge) 傳(chuan) 感器,當箱體(ti) 內(nei) 的CO2吸收了發射器發射的部分紅外線之後,傳(chuan) 感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應於(yu) 箱體(ti) 內(nei) CO2的水平,從(cong) 而可以得出箱體(ti) 內(nei) CO2的濃度。由於(yu) IR係統是通過紅外線減少來確定箱內(nei) CO2濃度,而箱體(ti) 內(nei) 顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR係統對箱體(ti) 內(nei) 顆粒物的多少比較敏感,因此IR傳(chuan) 感器應用在含HEPA高效空氣過濾器的培養(yang) 箱內(nei) 比較合適。
2. CO2測量係統自動校準功能:
無論哪種CO2測量係統在使用一段時間後都會(hui) 產(chan) 生漂移,而產(chan) 生漂移後直接會(hui) 導致箱體(ti) 內(nei) 二氧化碳濃度不能穩定在我們(men) 的設定值,致使培養(yang) 失敗,所以我們(men) 在這裏強烈建議用戶在選購培養(yang) 箱時必須要選擇帶有CO2測量係統自動校準功能的培養(yang) 箱。
3. CO2濃度均一性:此點與(yu) 溫度均一性的要求類似,在此就不做贅述。
三、相對濕度
箱內(nei) 濕度對於(yu) 培養(yang) 工作來說是一項非常重要然而又經常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平並且要有足夠快的濕度恢複速度(如在開關(guan) 門後)才能保證不會(hui) 由於(yu) 過度幹燥而導致培養(yang) 失敗。目前大多數的二氧化碳培養(yang) 箱是通過增濕盤的蒸發作用產(chan) 生濕氣的(其產(chan) 生的相對濕度水平可達95%左右,但開門後濕度恢複速度很慢)。我們(men) 在此建議用戶在選購二氧化碳培養(yang) 箱的時候盡量選擇濕度蒸發麵積大的培養(yang) 箱,因為(wei) 我們(men) 知道濕度蒸發麵積越大,越容易達到最大相對飽和濕度並且開關(guan) 門後的濕度恢複的時間越短。
四、防汙染設計和消毒滅菌係統
汙染是導致細胞培養(yang) 失敗的一個(ge) 主要因素,因而,二氧化碳培養(yang) 箱的製造商們(men) 設計了多種不同的裝置去減少和防止汙染的發生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區域和表麵,並結合自動排除汙染裝置來有效防止汙染的產(chan) 生。例如,鑒於(yu) CO2培養(yang) 箱在使用過程中有時會(hui) 伴有黴菌生長,為(wei) 確保培養(yang) 箱免受汙染並且保證儀(yi) 器箱體(ti) 內(nei) 的生物清潔性,相繼問世了多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yang) 箱;還有的設計生產(chan) 了HEPA過濾器能過濾培養(yang) 箱內(nei) 空氣,可過濾除去99.97%的0.3微米以上的顆粒;此外,還開發設計了能使箱內(nei) 達到高溫濕熱的環境從(cong) 而殺死汙染微生物,達到消毒滅菌目的的培養(yang) 箱。這些裝置對於(yu) 細胞培養(yang) 來說是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?首先,我們(men) 考慮的當然是各種方式的滅菌能力,紫外消毒能力是與(yu) 紫外燈距離目標的距離的二次方成反比,距離越遠,消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,難以達到徹底滅菌的要求;
HEPA過濾器由於(yu) 受到過濾膜孔徑的影響,無法去除病毒和一些微小細菌,也有其局限性;相比較而言,高溫消毒是目前比較有效消毒滅菌的方法,高溫消毒又分為(wei) 兩(liang) 類,一是傳(chuan) 統的高溫幹熱消毒,另一種是先進的高溫濕熱滅菌。
接下來我們(men) 重點說一下高溫幹熱和高溫濕熱兩(liang) 種方法的優(you) 劣。高溫濕熱由於(yu) 蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,因此該法的滅菌效率比幹熱滅菌法高。其原因有三:
①蛋白質凝固所需的溫度與(yu) 其含水量有關(guan) ,含水量愈大,發生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體(ti) 蛋白質吸收水分,所以較同一溫度的幹熱空氣中易於(yu) 凝固。
②濕熱滅菌過程中蒸汽放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比幹熱所需溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時間比幹熱短。
③濕熱的穿透力比幹熱大,使其深部也能達到滅菌溫度,故濕熱比幹熱收效好一些。
所以高溫消毒並不是簡單的看消毒溫度,主要是看是否濕熱消毒。另外,從(cong) 使用角度看,濕熱消毒一般控製在90℃就能達到很徹底的消毒效果,整個(ge) 消毒過程中培養(yang) 箱內(nei) 的所有附件都不用取出,可以全部進行消毒;而幹熱消毒為(wei) 了達到較好的效果,溫度一般都在100℃以上,在這種溫度下消毒培養(yang) 箱內(nei) 的傳(chuan) 感器、HEPA過 濾器等都要在消毒過程中取出,等消毒結束再裝上,這樣即麻煩,附件又不能同時消毒,而且增加二次汙染的幾率,再者要達到100℃以上的高溫,培養(yang) 箱的加熱 係統的電熱絲(si) 必然要加粗,這會(hui) 導致培養(yang) 箱的溫度控製難度增加,均一性變差。所以我們(men) 建議用戶在選購二氧化碳培養(yang) 箱時選擇含高溫濕熱滅菌方式的培養(yang) 箱。
五、其它因素
二氧化碳培養(yang) 箱的容積也是一個(ge) 不可忽略的因素,買(mai) 小了不夠用,大了又浪費又占地方。二氧化碳培養(yang) 箱的可選容積非常廣,而且每種類型又有不同的容積可選。此時,就需要您在選購前對所需培養(yang) 箱容積的範圍有一個(ge) 比較準確的了解,並在此基礎上多預留一點空間,以保證不時之需。
此外,每一個(ge) 使用者都希望所用的儀(yi) 器能夠方便好用,微處理控製係統和其它各種功能附件(如高溫自動調節和警報裝置、CO2警報裝置、密碼保護設置、自動校準係統、LCD顯示係統等等)的運用,就使得二氧化碳培養(yang) 箱的操作和控製都非常的簡便。不同的微處理係統雖然名字不相同,但是其原理與(yu) 控製效果則無甚區別,選購時不必太在意它們(men) 名字上的區別,關(guan) 鍵是要自己覺得使用起來方便,容易操作。