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動物源性樣品中瘦肉精檢測的解決方案
[2011/3/24]
瘦肉精是一類動物用藥,有數種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。將瘦肉精添加於飼料中,可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。在中國,通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經作為藥物用於治療支氣管哮喘,後由於其副作用太大而遭禁用。
動物源性樣品中瘦肉精的檢測方法:
1. 動物源性樣品中β-受體激動劑的檢測(SPE-LC/MS)
1) SPE方法
貨號:60107-304
固定相:Thermo HyperSep Retain-CX
柱體積:3ml
固定相重量:200mg
酶解:動物源性樣品2g(精確到0.01g)於50ml離心管中,加入0.2mol/L乙酸銨溶液(pH5.2)10ml,然後加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶40μl,渦旋混勻3min,於37℃下水浴避光振蕩16h。
提取:樣品酶解後放置至室溫,渦旋混勻3min,高速離心10min,取出上清液,加入1mol/L高氯酸溶液1ml,渦旋,混勻,高速離心10min後,轉移上清液至另一50ml離心管內。
活化:3ml甲醇,3ml水,3ml0.5mol/L高氯酸
上樣:樣品
清洗:3ml水,3ml甲醇,柱子抽幹
洗脫:3ml5%氨水甲醇溶液
2)LC/MS方法
色譜柱:Hypersil Gold,5μm,2.1×150mm
貨號:25005-152130
流動相:A:水(5mM乙酸銨)B:甲醇,梯度洗脫程序:
進樣量:10μL
流速:250μL /min
MS條件:電噴霧電離源(ESI),正離子模式
選擇反應監控(SRM)掃描模式
噴霧電壓:4500V
離子傳輸管溫度:350℃
結果
1. 典型LC/MS/MS色譜圖
3. 定量限(LOQ):本方法沙丁胺醇、非諾特羅、氯丙那林、萊克多巴胺、克倫特羅、妥布特羅、噴布特羅和心得安在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動物源性食品組織中的定量限均可達0.1μg/kg,西馬特羅、特布他林為0.5μg/kg。
提取回收率均可達75-120%。
動物源性樣品中瘦肉精的檢測方法:
1. 動物源性樣品中β-受體激動劑的檢測(SPE-LC/MS)
1) SPE方法
貨號:60107-304
固定相:Thermo HyperSep Retain-CX
柱體積:3ml
固定相重量:200mg
酶解:動物源性樣品2g(精確到0.01g)於50ml離心管中,加入0.2mol/L乙酸銨溶液(pH5.2)10ml,然後加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶40μl,渦旋混勻3min,於37℃下水浴避光振蕩16h。
提取:樣品酶解後放置至室溫,渦旋混勻3min,高速離心10min,取出上清液,加入1mol/L高氯酸溶液1ml,渦旋,混勻,高速離心10min後,轉移上清液至另一50ml離心管內。
活化:3ml甲醇,3ml水,3ml0.5mol/L高氯酸
上樣:樣品
清洗:3ml水,3ml甲醇,柱子抽幹
洗脫:3ml5%氨水甲醇溶液
2)LC/MS方法
色譜柱:Hypersil Gold,5μm,2.1×150mm
貨號:25005-152130
流動相:A:水(5mM乙酸銨)B:甲醇,梯度洗脫程序:
進樣量:10μL
流速:250μL /min
MS條件:電噴霧電離源(ESI),正離子模式
選擇反應監控(SRM)掃描模式
噴霧電壓:4500V
離子傳輸管溫度:350℃
結果
1. 典型LC/MS/MS色譜圖
3. 定量限(LOQ):本方法沙丁胺醇、非諾特羅、氯丙那林、萊克多巴胺、克倫特羅、妥布特羅、噴布特羅和心得安在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動物源性食品組織中的定量限均可達0.1μg/kg,西馬特羅、特布他林為0.5μg/kg。
提取回收率均可達75-120%。