分光光度計條件限製性都有哪些

[2011/5/3]

  分光光度計工作原理的限製性條件分光光度計的工作原理是是物質對光的選擇吸收和琅伯-比爾定律。

  論琅伯-比爾定律的限製性條件:

  其一:通過溶液的光必須是平行的;

  其二:通過溶液的光必須是單色光;

  其三:待測溶液必須是純淨的、均勻的且濃度不宜過高,這是琅伯-比爾定律首要的三個前提條件。

  在實際的分光光度計的製造和使用過程中這三個條件是不可能達到的:

  其一:因為光是直線傳播的,在分光光度計製造過程中,燈源發出的光是發散的,經過聚焦鏡進行聚焦等直到經過溶液的整體過程中,光是不可能平行的。

  其二:燈源發出的光是複合光,經過狹縫,再經過光柵分光等步驟,因為受到狹縫和光柵本身的限製,光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問題,光度計不可能沒有其它的雜光存在。

  其三:用戶的溶液也不可能是純淨的,也會含有一些雜質,這些對光度的吸收都會存在影響。除以上三個方麵的影響外,在實際的光度計應用過程中還會存在其他因素的影響,例如:

  1、經過比色皿的光是否垂直;

  2、比色皿寬度是否為10mm的標準值;

  3、測試波長是否準確;

  4、程序設計是否存在漏洞等等,都會直接影響到利用琅伯-比爾定律計算出的結果。

  所以在日常的測試過程中,得出的結果和琅伯-比爾定律有些偏差是很正常的,隻是我們關注偏差多少的問題。